domingo, 18 de junio de 2017

Stem Cells en Diabetes.

La medicina regenerativa abre la posibilidad de utilizar células madre con capacidad de diferenciarse en células productoras de insulina, utilizando de manera conjunta factores tróficos que serían capaces de estimular a las propias células madre de cada parénquima.
Las células madre son capaces de dividirse indefinidamente y diferenciarse a distintos tipos de células especializadas, no sólo morfológicamene, sino también en forma funcional.

Se utilizo células mesenquimales de sangre de cordón umbilical humano, lograron obtener clusters de células productoras de insulina por medio de la estimulación con exenatida y la adición de un gel de matriz extracelular en las placas de cultivo.

También se realizaron estudios donde se adicionaron, a cultivos de células de médula ósea de ratas, compuestos que incrementan la expresión de factores de transcripción y crecimiento, dando como resultado la formación de acúmulos celulares que respondían a estímulos de glucosa, produciendo insulina.




Webgrafia:

domingo, 11 de junio de 2017

Trasngenico en diabetes

La insulina se introdujo para el tratamiento diabetes mellitus a comienzos de los años ochenta, sin comparaciones adecuadas de eficacia con las preparaciones de insulina de cerdos y vacas. Esto provocaba una reacción inmune en contra de la insulina, que producía reacciones adversas como alergias y terminaba siendo ineficaz.

En 1963, la insulina se convirtió en la primera proteína en ser sintetizada in vitro, por Meinhofer y colaboradores , pero con un rendimiento bastante pobre, lo que impedía su utilización masiva contra la diabetes. Así llegamos a la insulina transgénica ya que, en el año 1978, gracias al desarrollo de técnicas biotecnológicas.

Actualmente, la insulina humana transgénica puede obtenerse de bacterias como E.coli  o levaduras de pan, que al ser de nuestra propia especie, no causa efectos adversos. Su  obtención es mucho más rápida y eficiente, por lo que el precio del medicamento disminuyó considerablemente. 


Webgrafia: 

Invitado C. Naukas. [Online].; 2012 [cited 2017 Junio 11. Available from: http://naukas.com/2012/01/05/exitos-transgenicos-la-insulina/.

domingo, 4 de junio de 2017

ADN recombinate en naturaleza y artificial.

ADN recombinante en la naturaleza.

Un ejemplo de ADN recombinante, que ocurre normalmente en la naturaleza, es la recombinación genética. La recombinación genética es un proceso que lleva a la obtención de un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de ADN de dos orígenes diferentes.              
La información genética de dos genotipos puede ser agrupada en un nuevo genotipo mediante recombinación genética. Por lo tanto la recombinación genética es otra forma efectiva de aumentar la viabilidad genética de un población.
Un ejemplo tenemos: 
EPISOMAS, en bacterianas después de una conjugación, al ceder una cadena monocatenaria de material extracromosómico (Plásmido) a una bacteria cerente de este, termina en la agregación al cromosoma circular del organismo procariote. 


ADN artificial en la naturaleza.
Es una célula de ADN artificial integrada de manera deliberada in vitro por la desunión de secuneicas de ADN. 
Un ejemplo que tenemos: 
Glusilina: se obtiene por ADN recombinante producido en E. coli; sirve únicamente para el tratamiento en pacientes adultos.

Webgrafia:. 




domingo, 28 de mayo de 2017

Otra Prueba Molecular de la Diabetes


Microarrays


Microarrays de ADN es el método para estudiar los mecanismos de las enfermedades como la obesidad y la diabetes tipo 2 (DT2). Perfiles de expresión génica es la principal aplicación de microarrays de ADN.



La grasa subcutánea, grasa visceral, adipocitos y preadipocitos, músculo, hígado, páncreas y núcleos específicos en el hipotálamo en condiciones normales y de enfermedad se utilizan en el tratamiento del perfil de expresión de genes en la obesidad y diabetes tipo 2. En esta revisión, la aplicación de microarrays para dilucidar el papel de la proteína de unión a retinol 4 como un vínculo entre la obesidad y la DM2.


Webgrafia:


domingo, 21 de mayo de 2017

Prueba de PCR

Tema: Variantes genotípicas del SNP -19 del gen de la CAPN 10 y su relación con la diabetes mellitus tipo 2 en una población de Ciudad Juárez, México

Objetivos: Determinar la relación entre el polimorfismo SNP-19 y la presencia de DM tipo 2 en una población de Ciudad Juárez

Muestra: Sangre periférica 
.
Tipo de ácido nucleico al ser extraído: ADN de linfocitos (génomico).

Extracción: 
Lisis
Separación          -Método de Miller modificado utilizando el kit de reactivos. 
Purificación 

Genes a amplificar : gen CAPN 10

Tipos de PCR: PCR convencional.

Pasos del PCR:

  • Desnaturalización: 94 °C por 30 seg. 
  • Hibridación: 60° C por 30 seg.                           -35 ciclos. 
  • Extensión: 72° por 30 seg. 

Visualización: Electroforesis



Webgrafia: 

Méndez YL, Leal GR, González AS, Verónica Portillo Reyes. Aula Médica. [Online].; 2015 [cited 2017 Mayo 5. Available from: http://www.aulamedica.es/nh/pdf/7729.pdf.

domingo, 14 de mayo de 2017

Prueba de tamizaje y confirmatoria en la Diabetes.

Pruebas de Tamizaje

  • Glicemia en Ayunas
  • TTOG
La glucemia en ayunas es la prueba más sencilla  para el tamizaje oportunístico de Diabetes Mellitus en personas asintomáticas que por algún motivo acuden a un servicio  de salud. Sin embargo, la prueba de oro para el  tamizaje de diabetes en estudios poblacionales  sigue siendo la medición de la glucemia 2 horas post  carga de glucosa .

Recomedaciones: 
  • Si la glicemia en ayunas es menor a 100 mg/dl y HbA1c menor a 5,7% se recomienda evaluar a intervalos de 3 años.
  • Aquellos con niveles en ayunas de 100-125 mg/dl, y con HbA1c 5,7-6,4% debe darse seguimiento anual. 
  • El diagnostico se confirma con dos HbA1c consecutivas > 6,5%, dos glicemias en ayunas consecutivas > 126 mg/dl, o si tanto la HbA1c y la glicemia en ayunas están alteradas en rango de diagnostico.
Pruebas Cofirmatorias. 
  • Determinación de anticuerpo por método de ELISA
  • Diagnostico de hemoglobina glicosilada 
Los síntomas como poliuria, polidipsia, polifagia, astenia o cetoacidosis conllevan a la sospecha clínica de la diabetes. 

Webgrafia:





Alteraciones de la Epigenética de la Diabetes Mellitus.

 Hay una hipótesis que postula que exposiciones dietéticas inadecuadas durante el desarrollo temprano condicionan, mediante mecanismos epigenéticos, el establecimiento de un patrón metabólico anómalo que aumenta la susceptibilidad a la diabetes en la etapa adulta . 
En adultos diabéticos, por otra parte, modificaciones epigenéticas causadas, por ejemplo, por cambios en los niveles de glucosa u otros metabolitos conducen al desarrollo de las complicaciones asociadas a la diabetes. Además, hay que tener en cuenta que el patrón de modificaciones epigenéticas causado por un estímulo particular puede que se manifieste solo en algunos tipos celulares pero no en otros, o hacerlo de forma diferente según el tejido. Por ejemplo, la identificación de cambios epigenéticos en el gen de la insulina tiene interés en las células β-pancreáticas y, posiblemente, no se verán reflejados en otros tipos celulares, como los monocitos. En cambio, la secuencia de ADN es igual en todos los tejidos, por lo que el estudio de mutaciones o polimorfismos puede realizarse en tejidos accesibles, como la sangre.

En pacientes diabéticos, alteraciones epigenéticas causadas en diferentes tejidos por la hiperglucemia mal controlada o cambios en los niveles de otros metabolitos pueden provocar complicaciones vasculares asociadas a la enfermedad.

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