domingo, 28 de mayo de 2017

Otra Prueba Molecular de la Diabetes


Microarrays


Microarrays de ADN es el método para estudiar los mecanismos de las enfermedades como la obesidad y la diabetes tipo 2 (DT2). Perfiles de expresión génica es la principal aplicación de microarrays de ADN.



La grasa subcutánea, grasa visceral, adipocitos y preadipocitos, músculo, hígado, páncreas y núcleos específicos en el hipotálamo en condiciones normales y de enfermedad se utilizan en el tratamiento del perfil de expresión de genes en la obesidad y diabetes tipo 2. En esta revisión, la aplicación de microarrays para dilucidar el papel de la proteína de unión a retinol 4 como un vínculo entre la obesidad y la DM2.


Webgrafia:


domingo, 21 de mayo de 2017

Prueba de PCR

Tema: Variantes genotípicas del SNP -19 del gen de la CAPN 10 y su relación con la diabetes mellitus tipo 2 en una población de Ciudad Juárez, México

Objetivos: Determinar la relación entre el polimorfismo SNP-19 y la presencia de DM tipo 2 en una población de Ciudad Juárez

Muestra: Sangre periférica 
.
Tipo de ácido nucleico al ser extraído: ADN de linfocitos (génomico).

Extracción: 
Lisis
Separación          -Método de Miller modificado utilizando el kit de reactivos. 
Purificación 

Genes a amplificar : gen CAPN 10

Tipos de PCR: PCR convencional.

Pasos del PCR:

  • Desnaturalización: 94 °C por 30 seg. 
  • Hibridación: 60° C por 30 seg.                           -35 ciclos. 
  • Extensión: 72° por 30 seg. 

Visualización: Electroforesis



Webgrafia: 

Méndez YL, Leal GR, González AS, Verónica Portillo Reyes. Aula Médica. [Online].; 2015 [cited 2017 Mayo 5. Available from: http://www.aulamedica.es/nh/pdf/7729.pdf.

domingo, 14 de mayo de 2017

Prueba de tamizaje y confirmatoria en la Diabetes.

Pruebas de Tamizaje

  • Glicemia en Ayunas
  • TTOG
La glucemia en ayunas es la prueba más sencilla  para el tamizaje oportunístico de Diabetes Mellitus en personas asintomáticas que por algún motivo acuden a un servicio  de salud. Sin embargo, la prueba de oro para el  tamizaje de diabetes en estudios poblacionales  sigue siendo la medición de la glucemia 2 horas post  carga de glucosa .

Recomedaciones: 
  • Si la glicemia en ayunas es menor a 100 mg/dl y HbA1c menor a 5,7% se recomienda evaluar a intervalos de 3 años.
  • Aquellos con niveles en ayunas de 100-125 mg/dl, y con HbA1c 5,7-6,4% debe darse seguimiento anual. 
  • El diagnostico se confirma con dos HbA1c consecutivas > 6,5%, dos glicemias en ayunas consecutivas > 126 mg/dl, o si tanto la HbA1c y la glicemia en ayunas están alteradas en rango de diagnostico.
Pruebas Cofirmatorias. 
  • Determinación de anticuerpo por método de ELISA
  • Diagnostico de hemoglobina glicosilada 
Los síntomas como poliuria, polidipsia, polifagia, astenia o cetoacidosis conllevan a la sospecha clínica de la diabetes. 

Webgrafia:





Alteraciones de la Epigenética de la Diabetes Mellitus.

 Hay una hipótesis que postula que exposiciones dietéticas inadecuadas durante el desarrollo temprano condicionan, mediante mecanismos epigenéticos, el establecimiento de un patrón metabólico anómalo que aumenta la susceptibilidad a la diabetes en la etapa adulta . 
En adultos diabéticos, por otra parte, modificaciones epigenéticas causadas, por ejemplo, por cambios en los niveles de glucosa u otros metabolitos conducen al desarrollo de las complicaciones asociadas a la diabetes. Además, hay que tener en cuenta que el patrón de modificaciones epigenéticas causado por un estímulo particular puede que se manifieste solo en algunos tipos celulares pero no en otros, o hacerlo de forma diferente según el tejido. Por ejemplo, la identificación de cambios epigenéticos en el gen de la insulina tiene interés en las células β-pancreáticas y, posiblemente, no se verán reflejados en otros tipos celulares, como los monocitos. En cambio, la secuencia de ADN es igual en todos los tejidos, por lo que el estudio de mutaciones o polimorfismos puede realizarse en tejidos accesibles, como la sangre.

En pacientes diabéticos, alteraciones epigenéticas causadas en diferentes tejidos por la hiperglucemia mal controlada o cambios en los niveles de otros metabolitos pueden provocar complicaciones vasculares asociadas a la enfermedad.

Webgrafia: